什么是激光共聚焦显微镜以及它的成像原理介绍

共聚焦显微镜是激光共聚焦显微镜的简称，它显微成像主要采用 3D 捕获的成像技术，使其具有较高的三维图像分辨率。这 些都是 通过构建显微照片来实现的。在荧光显微镜使用过程中，由于需要高强度紫外光辅助成像，所以显微镜 内的汞弧灯产生的强光可能会导致令人不安的背景噪音，甚至会导致光漂白。 激光共聚焦显微镜则是通过数码相机针孔的高强度激光来实现数字成像的技术，有效避免了荧光显微镜所产生的问题。

激光共聚焦显微镜的成像原理:

激光共聚焦显微镜中的图像是来自一个焦平面的光通过针孔数码相机聚焦拍摄，从而规避 来自其支点上方或下方的光。固定在设备上的激光连续聚焦在样品的选定区域，同时，被样品吸附的荧光染料也会被数码相机捕捉。共聚焦设备包含两个旋转镜头用来拍摄组图。

然后通过所累积的不同焦平面的图像序列，使用软件编译完整的 3d 图像。此图像可以在轴向（z 轴）和横向（x 和 y 轴）平面进行微调。这些细胞和其他矩阵的再现是通过使用双倒置的光锥照亮物体来实现的。

使用标准落射荧光显微镜所存在的问题是当遇到较厚的基质或标本时所表现出的荧光程度较大。大于 2 微米的样品发出的辐射会危及生成图像的准确性，从而损失成像的细节。而激光共聚焦显微镜则可以通过缩小激发范围并使用光学切片来消除背景噪声。